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    Ⅱ級生物安全柜的物理及生物檢測

    時間:2018-09-10 16:56 來源:蘇州凈化 作者:蘇州凈化

      生物安全柜是一種負壓箱式結構的安全設備, 用來保護操作本人、實驗室環境,避免操作原始 培養物、菌毒株以及診斷標本等具有傳染性的實驗 材料時可能產生的傳染性氣溶膠和濺出物[1,2]。

      二 級生物安全柜是目前應用廣泛的柜型[3]。按照 NSF49 中的規定,二級生物安全柜內的氣流在前操 作臺擋板處被下吹的氣流屏蔽阻斷,保證了生物安 全柜外環境及人員的安全[4,5]。 根據結構設計、排風比例及保護對象和程度 的不同,生物安全柜分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ級。Ⅰ級生 物安全柜僅保護人員和環境,不保護樣品; Ⅱ級生 物安全柜不僅能提供人員保護,而且能保護工作臺 面的物品以及環境不受其污染。

     ?、蚣壣锇踩裼?可以分為A 型和 B 型,A 型包括Ⅱ級 A1 型和Ⅱ級 A2 型,B 型包括Ⅱ級 B1 型和Ⅱ級 B2 型; Ⅲ級生物安全柜是一種完全封閉的、徹底不泄漏的通風安全 柜,通過連著的橡膠手套來進行安全柜內的操作, 俗稱手套箱(Gloves box),試驗品通過雙門的傳遞 箱進出安全柜以確保不受污染,適用于高風險的生 物試驗[6,7]。



    Ⅱ級生物安全柜的物理及生物檢測
     

      目前通用的生物安全柜是美 國的 NSF/ANSI 49 和歐盟的 EN12469,這兩種標 準對安全柜性能分級、安全性能檢測都有詳細的說 明和要求。我國分別在國標 GB19489-2004 及 GB50346-2004中規定了二級生物安全柜的物理技術 指標及檢測方法。生物安全柜標準的制定及認證對 規范安全柜市場及保護環境與研究人員起到了重要 的作用。 隨著生物安全實驗室的建立及生物安全實驗的 廣泛開展,我國出現了為數眾多的生物安全柜生產 廠家。生物安全柜污染控制性能是指安全柜確保所 有的危險顆粒不從操作窗口逃逸出去的能力。一臺 生物安全柜也許可以通過所有的氣流等物理測試, 但不一定能通過污染控制性能測試。為了準確檢驗 我國制作的生物安全柜的技術指標,全面對生物安 全柜進行安全評價,我中心環境檢測實驗室與比賽 福公司聯合對國產Ⅱ級生物安全柜樣品進行了物理 及生物指標檢測與安全評價實驗[8~10]。

      1 材料

      1.1 樣品 樣品制造商: 北京某生物安全柜制造廠。樣品 名稱: BSC-1100型 CLASSII A2﹑ BSC-1360型 CLASSII A2 型生物安全柜。

      1.2 檢測依據 物理指標: GB50346-2004生物安全實驗室建筑 技術規范、GB 14925-2001實驗動物環境及設施; 生 物學指標: GB19489-2004實驗室生物安全通用要 求、NSF /ANSI492 2002。 1.2.1 物理指標 a. 噪聲; b. 照度; c. 生物安全柜垂 直氣流風速; d. 生物安全柜工作窗口氣流風速; e. 工 作窗口風向。 1.2.2 生物指標 a. 保護人員的生物安全檢測; b. 保 護樣品的生物安全檢測; c. 防交叉污染的生物安全 檢測; d. 高效過濾器對環境保護的生物安全檢測。 1.3 檢測儀器 ST-85照度計(師大光電); HS5633數字聲級計 (北京檢測儀器廠); TSM-1A電風速計(北京檢測儀器 廠);輕質絲線。氣溶膠發生器(WesTech Engineering, Inc); 氣溶膠采樣器(WesTech Engineering, Inc); 指示菌。

      2 實驗方法

      2.1 生物安全柜物理檢測項目與方法

      按照“GB50346-2004生物安全實驗室建筑技 術規范”進行物理指標檢測[8]。 2.2 生物安全柜生物檢測方法 2.2.1 氣溶膠發生器 (1) 全玻璃直角噴霧器, 噴霧 壓力18 kg/cm2, 噴霧空氣流量15 L/min, 噴出量15~ 110 ml/min。 (2) TK2 同心圓發生器, 噴霧壓力 110 kg/cm2,噴霧空氣流量 10 L/min,噴出量 15 ml/min。 2.2.2 氣溶膠采樣器 (1) 全玻璃液體沖擊采樣器 (AGI2102111), 采樣空氣流量7 L/min, 采樣10 min。 (2) JWL 21 型空氣微生物采樣器, 采樣空氣流量 25 L/min, 采樣10 min。 (3)A1S 生物粒子采樣器, 采 樣空氣流量2813 L/min, 采樣時間30 min。 2.2.3 指示菌 粘質沙雷氏菌。挑取單菌落于營養 肉湯中,37℃,160 r/min,12 h,磷酸鹽緩沖液 稀釋后測定濃度。采集置37 ℃溫箱中培養24 h后 計數平皿的紅色沙雷氏菌落數。

      3 結果

      物理、生物檢測結果詳見表1 、2 。

      4 討論

      生物安全柜是生物實驗工作的第一道安全防護 屏障, 也是很關鍵的安全防護屏障[11]。實驗結果表 明, BSC-1100 CLASSII A2及BSC-1360 CLASSII A2 型生物安全柜的物理指標與生物指標都達到了設計 要求,能保障實驗工作人員的安全和防止對外環境 大氣的污染。

      4.1 生物安全柜現場安裝與檢測 生物安全柜過濾器的無損傷及整個柜體的密封 性是確保不發生泄漏的重要因素。因此安全柜生產 商應該對過濾器在安裝前及安裝后進行測試,以確 保過濾器是無泄露的。因為過濾器是非常脆弱的材 料(甚至落地或輕微碰撞就會損壞),所以,在運輸 和裝卸的過程中保證過濾器材不受損壞是非常重要 的。同樣的原因,過濾器應該在生物安全柜所安 置的實驗室進行現場測試[12]。

      4.2 生物安全柜的風量平衡 二級生物安全柜都設置能打開的工作窗口, 便于柜內操作但也帶來污染的可能。實驗室新風自 生物安全柜工作窗口下端的進風格柵進入,經高效 過濾自上垂直吹入柜內(≥0.25 m/s)。安全柜依靠 工作窗口處較強的進風(≥0.5 m/s)將柜內的污染氣 流屏蔽在柜內。如果生物安全柜的風量平衡不好, 就無法避免外界物質進入柜內污染樣品或柜內污染 物質的溢出感染操作者及污染環境。所以,二級 生物安全柜若與外風道連接,工作窗口的風流、 風量與垂直平衡問題極為關鍵。

      4.3 生物安全柜的標準及認證 安全柜不僅要從設計上注意操作的安全需求,也許要進行許多物理檢測,以確保安全柜能滿足安 全需求。這些測試應該由廠家在安全柜組裝完畢后 就進行。

      許多廠家都聲稱他們的產品在工廠就進行 了依據安全標準測試。但是,安全柜的物理測試 是一門精密學科,橫跨了很多領域(氣溶膠的 產生、光強測定、氣流流速測定、定向流驗證、 污染控制性能測試等等),因此,一個廠家很難保 證這些測試是安全和準確的,除非其測試設備和能 力經過了單獨的認證。另外,目前主要由 EN12469 (歐洲生物安全柜統一標準)、NSF49 (美國生物安 全柜標準-二級生物安全柜)、AS2252.2 (澳洲生物 安全柜標準-二級生物安全柜)、JIS K3800 (日本 生物安全柜標準) 等認證標準。需要指出的是 ISO9001 質量認證并不等于能對安全柜進行以上安全柜標準的檢測。

      目前國內有兩個安全柜標準,分別是國家食 品藥品監督局(SFDA)制定的YY0569-2005(2005年7 月 18日頒布,2006年6月1日實施)以及建設部頒 布的 JG170-2005(2005 年 3 月 25 日頒布,2005 年 6 月 1 日實施)。



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